牛傳染性鼻氣管炎( IBＲ) ，又稱壞死性鼻炎、紅 鼻病，是由牛傳染性鼻氣管炎病毒( IBＲV) 引起牛 的一種急性、熱性、接觸性傳染病，是 OIE 規(guī)定的 B 類動物疫病，我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部( 原農(nóng)業(yè)部) 將其定 為二類動物疫病。

1 材料與方法

1. 1 血清樣品

從西藏拉薩市、林芝市、日喀則市、昌都市、山南 市、那曲市和阿里地區(qū)等七個地區(qū)共采集未接種 IBＲ 疫苗的牦牛血清 300 份，其中拉薩市 30 份，其余 6 個 地區(qū)各 45 份。血清采回后－20 ℃ 保存，檢測前置于 室溫下自然解凍。

1. 2 主要儀器與試劑

酶標分析儀( 型號為 Ｒayto ＲT－6100) ，購自深圳 雷杜生命科學股份有限公司; 微量移液器( 型號為 dragon－lab) ，購自賽伯樂( 上海) 儀器有限公司; 優(yōu)普 超純水制造系統(tǒng)，購自成都超純科技有限公司; 恒溫恒濕培養(yǎng)箱，購自上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠; 冰箱，購自中科美菱低溫科技股份有限公司。 IBＲ 抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒、牛傳染性鼻氣管 炎抗原酶聯(lián)免疫分析試劑盒，均購自江蘇酶免實業(yè)有限公司。

1. 3 IBＲ 血清抗體、抗原的檢測

IBＲ 血 清 抗 體、抗原檢測嚴格按照酶聯(lián)免疫 ( ELISA) 分析試劑盒說明書方法操作。 結(jié)果判定: 陽性對照孔 OD450平均值≥1. 00，陰性 對照孔 OD450平均值≤0. 10 時，判定試驗成立; 陰性 對照孔平均值+0. 15 為臨界值; 樣品 OD450值＜臨界值 時，判定 為 陰 性; 樣 品 OD450 值 ≥ 臨界值時判定為 陽性。

1. 4 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析

采用 SPSS 19. 0 軟件對西藏各地區(qū)牦牛 IBＲ 血 清抗體陽性率進行顯著性分析，P＞0. 05 差異不顯著， P＜0. 05 差異顯著。

2 結(jié)果與分析

西藏七個地區(qū)牦牛血清樣品中 IBＲ 抗體、抗原 檢測結(jié)果見表 1。

從表 1 可見: 血清抗體平均陽性率為 11. 00% ( 33 /300) ，其中日喀則市和林芝市牦牛 IBＲ 血清抗 體陽性率最高，均為 17. 78%( 8 /45) ; 山南市最低，為 0( 0 /45) ; 血清抗原平均陽性率為 10. 00%( 30 /300) ， 其中日喀則市牦牛 IBＲ 血清抗原陽性率最高，為 20. 00%( 9 /45) ; 山南市最低，為 2. 22% ( 1 /45) 。對 七個地區(qū)牦牛血清樣品 IBＲ 抗體、抗原陽性率進行 顯著性分析，結(jié)果表明，日喀則市和林芝市牦牛 IBＲ 血清抗體陽性率與昌都市、山南市差異顯著 ( P ＜ 0. 05) ; 拉薩市牦牛 IBＲ 血清抗體陽性率與山南市差 異顯著( P＜0. 05) 。日喀則市牦牛 IBＲ 血清抗原陽性 率與阿里地區(qū)、昌都市和山南市差異顯著( P＜0. 05) ， 拉薩市牦牛 IBＲ 血清抗原陽性率與山南市差異顯著 ( P＜0. 05) 。

3 討論

自 1980 年周泰沖等首次從新西蘭進口至我 國的奶牛中分離到 IBＲV 以來，我國各地均出現(xiàn)了 IBＲ 流行的報道，且部分地區(qū)流行情況較為嚴重， 而與西藏相鄰的新疆、青海、四川等省區(qū) IBＲ 流行情 況也 令 人 堪 憂。胡 文 兵 等、李靜 等、劉潔 瓊 等分別于 2010 年、2012 年和 2016 年對新疆不同地區(qū)牛群的 IBＲ 感染情況進行調(diào)查，結(jié)果表明，抗體 陽性率分別為 36. 9%、82. 5%、80. 7%; 賀曉龍等、 沈艷麗等、韓照清等分別于 2009 年、2010 年和 2012 年對青海不同地區(qū)進行 IBＲ 流行情況調(diào)查，結(jié) 果表明，血清抗體陽性率分別為 47. 62%、19. 8% 和 44. 6%; 韓照清等、何美琳等于 2012 年、鄧宇 等于 2015 年在四川部分地區(qū)開展 IBＲ 流行情況 調(diào)查，結(jié) 果 表 明，血清抗體陽性率分別為 27. 9%、 77. 4%、35. 29%; 韓照清等2014 年在我國西部高 原地區(qū)的調(diào)查結(jié)果表明，西藏部分地區(qū) IBＲ 血清陽 性率為 38. 6%、青海部分地區(qū)為 44. 6%、四川部分地 區(qū)為 27. 9%; 曲萍等對包括四川、青海、新疆等在 內(nèi)的 11 個半農(nóng)半牧區(qū)的 IBＲ 血清學調(diào)查結(jié)果表明， 2014—2016 年的血清陽性率分別為 51. 46%、 57. 16%和 50. 16%; 同時有資料顯示，與西藏相鄰的 印度阿魯納恰爾邦牦牛 IBＲ 血清抗體陽性率也高達 41%，而本次牦牛 IBＲ 血清抗體檢測結(jié)果明顯低 于西藏周邊各省份及地區(qū)。